Pracownia hodowli komórkowych

Kierownik pracowni: dr hab. n. med. Alicja Chrzanowska

 

Prowadzone badania i usługi:

 

1. Badanie metabolizmu komórek nowotworowych z zastosowaniem związków, w tym również leków zaangażowanych w przemiany metaboliczne niezbędne do wzrostu guza (Teriflunomid, Telmisartan, Selol, Artemizyna, nowo zsyntetyzowane pochodne fluorochinolonów, salinomycyny i monenzyny, kwasy tłuszczowe, pochodnych tiomocznika, estry kumaryny oraz fosfiniany)

Badania obejmują:

- hodowlę linii komórkowych w warunkach standardowych jak również w różnych stężeniach tlenu – stan hipoksji (1% O2) i fizjoksji (10% O2), co odzwierciedla warunki panujące w tkance nowotworowej

- hodowle sferoidów 3D na TrueGel3D - testy żywotności do hodowli komórkowej 3D i 2D

- ocenę cytotoksyczności i jej mechanizmów (testy Trypan Blue, MTT, LDH, apoptoza, cykl komórkowy, tworzenie mikrotubul, kaspazy 3/7, białka antyapoptyczne – BCL-2, BCL-xL, interleukiny, czynnik NF-κB, VEGF, CCK-8, SRB, barwienie jodkiem propidyny z późniejszą analizą na cytometrze przepływowym)

- badanie masy i aktywności mitochondriów – testy MitoTracker, badanie potencjału błony mitochondrialnej - JC-10

- badanie parametrów stresu oksydacyjnego:

a. analiza ekspresji i aktywności enzymów antyoksydacyjnych (peroksydaza glutationowa, reduktaza glutationowa, transferaza glutationowa, katalaza) metodą Real-Time, PCR, ELISA oraz metodami spektrofotometrycznymi

b. analiza poziomu reaktywnych form tlenu – CellROX, test MDA, mitoROS

c. ocena stężenia zredukowanego i utlenionego glutationu metodą spektrofotometryczną

2. Analiza proteomiczna i metabolomiczna w surowicy krwi pacjentów z chorobą Wilsona przeprowadzona w systemie Ultrawysokorozdzielczej Spektrometrii Mas

3. Prowadzenie badań na surowicy, płynie mózgowo-rdzeniowym i moczu od pacjenów Postępującego porażenie nadjądrowego (PSP) czynniki zapalne ( interleukiny 1beta, 6, TNF alfa), bialko tau, VCAM , transferryna, hepcydyna oraz badania proteomiczne i lipidomiczne

4. Oznaczanie TNF alfa, IL2, IL10, HMGB1 i 8-OHdG w surowicy pacjentów po przeszczepie wątroby oraz poziom ATP i MDA w bioptatach z przeszczepianej wątroby. Badania przeprowadzane w ramach projektu oceny potencjalnego wpływu hipotermicznej utlenionej perfuzji maszynowej na zmniejszenie stopnia uszkodzenia wątroby pobieranej od dawców po śmierci mózgowej

5. Testy do szybkiej oceny stanu i funkcji przeszczepianej wątroby: badanie przejrzystości płynu perfuzyjnego metodą turbidymetryczną (Extona). Ocena gęstości wątroby, oznaczanie aktywności arginazy, stężenia ciał ketonowych (KBR- ketone bodies ratio=acetooctan/3-hydroksymaślan) oraz całkowitej zawartości lipidów i białka

6. Badanie wpływu pyłu zawieszonego PM2.5 na komórki nabłonka układu oddechowego oraz śródbłonek naczyń krwionośnych (HUVEC)

 

GRUPA DR HAB. ALICJI CHRZANOWSKIEJ

 

Obraz
zespol

Zespół (od lewej): mgr biol. Paulina Strzyga-Łach, dr n. med. Barbara Żyżyńska-Granica, dr hab. n. med. Alicja Chrzanowska, dr n. med. Dagmara Kurpios-Piec, (dolny rząd od lewej): tech. Jolanta Surdyk, dr n. med. Dagmara Otto-Ślusarczyk, dr n. med. Magdalena Mielczarek-Puta